Seroprevalencia de la infección por Trypanosoma cruzi en la población rural del estado Sucre, Venezuela / Seroprevalence of Trypanosoma cruzi infection in the rural population of Sucre State, Venezuela / Soroprevalência de infecção pelo Trypanosoma cruzi na população rural do Estado de Sucre, Venezuela

Resumen: El objetivo del presente estudio fue determinar la seroprevalencia de la infección por Trypanosoma cruzi en el estado Sucre (Venezuela) y su asociación con factores de riesgo epidemiológicos. El diseño muestral por conglomerados permitió seleccionar 96 centros poblados y 576 viviendas en los 15 municipios del estado. Asimismo, se evaluaron un total de 2.212 muestras de sueros, a través de las pruebas de ELISA, HAI e IFI. La seroprevalencia en el estado Sucre fue de 3,12%. Los factores de riesgo asociados a la infección por T. cruzi fueron: deposición de basura, materiales predominantes en el piso y paredes, tipo de vivienda, vivir en casas con paredes de bahareque y/o techos de palmas, vivir en casa con paredes y techos de riesgo, construcciones de riesgo y anexos de bahareque, aves dentro de la vivienda y la presencia de leña. La infección se encontró asociada a la edad de los individuos, se detectaron tres casos seropositivos en menores de 15 años. En el estado Sucre existen variables epidemiológicas que favorecen el riesgo a contraer la infección por T. cruzi.

Abstract: The current study aimed to determine the seroprevalence of Trypanosoma cruzi infection in Sucre State, Venezuela, and its association with epidemiological risk factors. The cluster sampling design allowed selecting 96 villages and 576 dwellings in the State's 15 municipalities. A total of 2,212 serum samples were analyzed by ELISA, HAI, and IFI. Seroprevalence in Sucre State was 3.12%. Risk factors associated with T. cruzi infection were: accumulated garbage, flooring and wall materials, type of dwelling, living in a house with wattle and daub walls and/or straw roofing, living in a house with risky walls and roofing, risky buildings and wattle and daub outbuildings, poultry inside the human dwelling, and presence of firewood. Infection was associated with individual age, and three seropositive cases were found in individuals less than 15 years of age. Sucre State has epidemiological factors that favor the risk of acquiring T. cruzi infection.

Resumo: O estudo teve como objetivo determinar a soroprevalência da infecção pelo Trypanosoma cruzi no Estado de Sucre, Venezuela, e a associação com fatores de risco epidemiológicos. O delineamento da amostragem em clusters permitiu a seleção de 96 vilarejos e 576 moradias nos 15 municípios do Estado. No total, 2.212 amostras de soro foram analisadas com ELISA, HAI e IFI. O estudo mostrou uma soroprevalência de 3,12% no Estado de Sucre. Os seguintes fatores de risco estiveram associados à infecção pelo T. cruzi: acúmulo de lixo, materiais de piso e paredes impróprios, tipo de moradia, moradias com paredes de pau-a-pique e/ou teto de palha, moradias em situação de risco e construções anexas feitas de pau-a-pique, aves dentro das moradias e presença de lenha. A infecção esteve associada à idade individual, e três casos soropositivos foram identificados em indivíduos com menos de 15 anos de idade. O Estado de Sucre apresenta fatores epidemiológicos que aumentam o risco de infecção pelo T. cruzi.

Production of a conjugate between the rK346 antigen from Leishmania infantum and the horseradish peroxidase C for the detection of rK346 antibodies / Producción de un conjugado entre el antígeno rK346 de Leishmania infantum y la peroxidasa C de rábano picante para la detección de anticuerpos rK346

It was designed and characterized a reporter system to be captured by antibodies bound to ELISA plates. The system was designed with the rK346 from Leishmania infantum, a highly antigenic and specific protein. The rK346 was coupled to the horseradish peroxidase C (HRPc) from Armoracia rusticana using glutaraldehyde or sulfo-SMCC. Glutaraldehyde conjugation was performed in two steps. Separation of conjugates was carried out using a Sepharose S-200 in size exclusion chromatography (SEC); fractions were analyzed via HRPc activity and through ELISA plates sensitized with polyclonal anti-rK346 IgG purified from rabbit serum. A heterogeneous population of conjugates rK346-HRPc was obtained with molecular weights ranging between 109.7 ± 16.5 to 67.6 ± 10.1 kDa; with rK346-HRPc stoichiometries of 1:2; 2:1; 3:1; and 2:2. Conjugation using sulfo-SMCC was carried out first by introducing -SH groups onto the HRPc using the SATA reagent and the antigen was modified with sulfo-SMCC during 45 min. Separation and analysis of conjugates was performed similarly as with glutaraldehyde, resulting in a heterogeneous population of conjugates rK346-HRPc with molecular weights between 150.5 ± 22.6 to 80.0 ± 12.0 kDa; with rK346-HRPC stoichiometries of 2:1; 1:2; 2:2; and 1:3, with an increased conjugation efficiency in comparison with glutaraldehyde. This enables sulfo-SMCC to be used as a potential reagent for coupling the antigen to the HRPc, to design an economic, specific and easy method to apply as a reporter system, available to assess individuals at risk and/or at early and late stages of visceral leishmaniasis.

Se diseñó y caracterizó un sistema reportero para ser capturado por anticuerpos enlazados a placas de ELISA. El sistema fue diseñado con una proteína altamente antigénica y específica, la rK346 de Leishmania infantum. La rK346 fue acoplada a la peroxidasa C de rábano picante (HRPc) de Armoracia rusticana usando glutaraldehido o sulfo-SMCC. La conjugación con glutaraldehido fue realizada en dos pasos. La separación de los conjugados fue llevada a cabo a través de una cromatografía de exclusión molecular sefarosa S-200 (CES), las fracciones fueron analizadas midiendo la actividad HRPc y por placas ELISA sensibilizadas con inmunoglobulina G policlonal anti-rK346, purificada desde suero de conejo. Se obtuvo una población heterogénea de conjugados rK346-HRPc en un rango de pesos moleculares entre 109,7 ± 16,5 a 67,6 ± 10,1 kDa; con estequiometria rK346-HRPc de 1:2; 2:1; 3:1; y 2:2. La conjugación usando sulfo-SMCC se llevó a cabo primero introduciendo grupos -SH en la HRPc usando el reactivo SATA; el antígeno se modificó con sulfo-SMCC. La separación y el análisis de los conjugados se realizaron de forma similar que con el glutaraldehido, resultando en una población heterogénea de conjugados rK346-HRPc con un rango de pesos moleculares entre 150,5 ± 22,6 a 80,0 ± 12,0 kDa; con estequiometria rK346-HRPC de 2:1; 1:2; 2:2 y 1:3, y con una eficiencia de conjugación incrementada en comparación con glutaraldehido. De esta forma, se habilitó al sulfo-SMCC como un reactivo potencial para acoplar antígenos a la HRPc, como método para el diseño de un sistema reportero económico, especifico y fácil de aplicar, útil en la evaluación de individuos en riesgo y/o en estados tempranos o avanzados de leishmaniasis visceral.

Estudio entomológico de vectores transmisores de la infección por Trypanosoma cruzi en la población rural del estado Sucre, Venezuela / Entomological study of Trypanosoma cruzi vectors in the rural communities of Sucre state, Venezuela

Introducción. Debido a los cambios ambientales y a la intervención del hombre en los espacios silvestres, se ha cambiado el nicho ecológico de los vectores reduvídeos. Objetivo. En el presente estudio se evaluó la situación actual de los índices entomológicos de los triatominos responsables de la transmisión de Trypanosoma cruzi en el estado Sucre. Materiales y métodos. Se llevó a cabo un estudio prospectivo transversal en 96 centros poblados y 576 viviendas de los 15 municipios del estado Sucre, Venezuela, entre agosto y noviembre de 2008. Los vectores se identificaron con base en sus características morfológicas. La identificación de Trypanosoma spp. en las heces de los triatominos se hizo mediante el examen directo por microscopía. Las láminas positivas se tiñeron con Giemsa y los parásitos se identificaron por sus características morfológicas. Resultados. Los índices entomológicos con los valores más elevados fueron la dispersión en centros poblados rurales del estado Sucre (16,67 %) y la colonización de las viviendas (33,33 %). Las especies de triatominos capturados fueron Rhodnius prolixus , Rhodnius pictipes , Rhodnius robustus , Triatoma maculata y Panstrongylus geniculatus , siendo T . maculata el principal vector en el domicilio. Conclusiones. A pesar del bajo índice de infección natural en vectores (1,72 %), la existencia de especies con éxito reproductivo en el domicilio y el peridomicilio puede garantizar el mantenimiento de la cadena epidemiológica, tanto de la enfermedad como del parásito.

Introduction: The ecological niche of Reduvidae vectors has been modified due to environmental changes and human encroachment into the rural areas. Objective: This study evaluates the current entomological indices of triatomines responsible for Trypanosoma cruzi infection in Sucre State, Venezuela. Materials and methods: A cross-sectional and prospective study was conducted in 95 towns and 577 dwellings in the 15 municipalities of the state of Sucre, Venezuela, from August to November, 2008. Triatomine bugs were identified on the basis of morphological characteristics, and their feces examined for T. cruzi infection through direct microscopy. Positive slides were stained with Giemsa and parasites were identified by morphologic characterization. Results: The entomological indices expressing the highest values were dispersion (16.67%) and household colonization (33.33%). The triatomine species captured were: Rhodnius prolixus , Rhodnius main intradomiciliaryvector. Conclusions: Despite the low index of vector infection (1.72%), the existence of species with domiciliary and peridomiciliary reproductive success ensures the persistence of the epidemiological chain both for the disease and the parasite.

Seroprevalencia de la infección por Trypanosoma cruzi en Canis familiaris del estado Sucre, Venezuela / Seroprevalence of T. cruzi infection in Canis familiaris, state of Sucre, Venezuela.

Introducción. En Venezuela, la infección por T. cruzi en humanos ha sido ampliamente estudiada; sin embargo, en reservorios ha sido menos abordada. El objetivo de este trabajo fue determinar la seroepidemiología de la infección por T. cruzi en perros en el estado Sucre, Venezuela. Materiales y métodos. Se llevó a cabo un estudio prospectivo transversal en 95 centros poblados y 577 viviendas de los 15 municipios del estado Sucre, Venezuela, entre agosto y noviembre de 2008. Los sueros se evaluaron con el estuche CruziELISA y la prueba de unión de múltiples antígenos (Multiple Antigen Binding Assay, MABA). Además, se aplicaron encuestas epidemiológicas para evaluar los factores de riesgo. Resultados. Se evaluaron 363 perros (edad promedio: 2,6 ± 2,2 años, 226 machos y 137 hembras). Con la combinación de las pruebas ELISA/MABA se detectaron 78 sueros positivos, 69 negativos y 10 resultados inconclusos. La seroprevalencia de la infección para T. cruzi en perros, en el estado Sucre fue de 22,1 % (IC95%: 20,58-22,4). No se encontró asociación estadística significativa entre la infección por T. cruzi en perros y las variables epidemiológicas evaluadas: perros cazadores, dormir al aire libre, deambular libremente por el centro poblado, sexo del animal y hábitos de alimentación. La infección por T. cruzi estuvo asociada a la edad de los perros, y fue significativamente mayor en el grupo de 0 a 3 años, en comparación con los perros mayores. Conclusiones. La alta seroprevalencia detectada en los perros muestra que en esta región de Venezuela existe un factor de riesgo importante de transmisión de este parásito a poblaciones humanas.

Introduction: Trypanosoma cruzi infection in humans has been extensively studied in Venezuela; however, in reservoirs it has been less investigated. Objective: The objective of this study was to determine the seroepidemiology of T. cruzi in the state of Sucre, Venezuela. Materials and methods: A cross-sectional and prospective study conducted in 95 towns and 577 dwellings in the 15 municipalies of the state of Sucre, Venezuela, from August to November, 2008. The evaluation of serum samples was performed with the CruziELISA kit and the multiple antigens binding assays (MABA). Furthermore, epidemiological surveys were applied to evaluate the risk factors. Results: A total of dogs (average age of 2, 6 + 2.2 years, 226 males and 137 females) was evaluated. The combination of the ELISA / MABA tests detected 78 positive sera, sixty-nine negative and 10 of inconclusive results. The seroprevalence of the T. cruzi infection in dogs in the state of Sucre, was 22.1% (CI 95%: 20.58-22.4%). No significant statistic association was found between the T. cruzi infection in dogs and the evaluated epidemiological variables: hunting dogs that slept oudoors roaming freely in the populated center, sex of the animal and eating habits. The T. cruzi infection was associated to the age of canines, being significantly higher in the group of 0 to 3 years, when compared with older dogs. Conclusions: The high T. cruzi seroprevalence dected in dogs shows that in this región of Venezuela there prevails an important risk factor of transmissibility of this parasite to human populations.